產品簡介

麥胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）是廣泛應用于細胞生物學的凝集素之一。WGA識別的糖類受體是N-乙酰葡糖胺（GlcNAc），傾向與N-乙酰葡糖胺的二聚體和三聚體結合。WGA能結合含N-乙酰葡糖胺末端或殼二糖的寡糖，這類結構在許多血清和膜來源糖蛋白中普遍存在。細菌細胞壁肽聚糖、甲殼素（幾丁質）、軟骨糖胺聚糖和糖脂也能結合WGA。天然WGA還能通過N-乙酰神經氨酸（唾液酸）殘基與一些糖蛋白相互作用。WGA適用于胰島素受體的純化、血清蛋白和神經示蹤。

麥胚凝集素（Wheat Germ Agglutinin，WGA）通常用來標記糖蛋白，用于活細胞或固定細胞的質膜成像，用于組織切片染色或其它標準的免疫分析實驗。WGA能用作一種革蘭氏染色劑，熒光標記革蘭氏陽性菌（非革蘭氏陰性菌）。還能用于結合出芽酵母（比如釀酒酵母）的出芽痕。

本品是Alexa Fluor 488標記的麥胚凝集素（Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488- WGA），Ex/Em=495/519nm，親和純化所得，基本不含未標記的熒光素。建議工作濃度范圍是5-20μg/ml。

產品特性

1） 英文同義名：Wheat Germ Agglutinin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488 labeled Wheat Germ Agglutinin; Wheat germ agglutinin lectin, Alexa Fluor 488 Conjugate; Alexa Fluor 488labeled WGA Lectin;

2） 中文同義名：麥胚凝集素，Alexa Fluor 488標記；Alexa Fluor 488標記的麥胚凝集素；Alexa Fluor 488標記的小麥胚芽凝集素；

3） 糖類特異性：N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）

4） 外觀：固體

5） Ex/Em：495/519nm

6） 熒光顏色：綠色

7） 應用：IF、糖生物學

保存與運輸方法:-20℃避光干燥保存，至少1年有效。冰袋運輸。

質膜標記操作流程

1、儲存液準備

于使用前，將低溫保存的Alexa Fluor 488-WGA（1mg）置于室溫回溫至少30min，低速離心2-3min，往管內加入500µl ddH2O（無菌）制備2mg/ml儲存液。短時間使用可保存在2-8℃，長時間使用請根據單次用量分裝保存后置于-20℃保存，避免反復凍融，至少一個月穩定。

2、標記活的真核細胞

以下是對貼壁培養在蓋玻片上的活細胞的通用染色步驟。用戶需根據不同的模型系統和預期效果來優化染色時間和濃度。

2.1制備染色工作液：用合適的生理緩沖液，比如：HBSS（無酚紅）（Cat#：FSH041-500ML）或HHBS（Cat#：FSH043-500ML），稀釋Alexa Fluor 488-WGA（2mg/ml）儲存液到工作濃度，常用工作濃度范圍為5-20μg/ml。使用細胞培養基稀釋WGA偶聯物用于標記可能導致增高的非細胞染色背景。

2.2細胞標記：加入足量的染色工作液完全覆蓋蓋玻片上的細胞。37℃孵育10-30min。

2.3細胞清洗：標記結束后，吸走染色工作液，用合適的緩沖液清洗細胞2次。除非細胞要做固定，此時即可在預熱的HBSS或其它適合于成像的緩沖液中封片。

2.4【可選】細胞固定：可能用4%多聚甲醛固定染色好的細胞，37℃ 15min，之后用緩沖液清洗，以及做另一種復染。如有必要用0.2% Triton X-100透化細胞。

3、標記固定的真核細胞

以下是對貼壁培養、甲醛固定且未做透化處理細胞的通用染色步驟。用戶需根據不同的模型系統和預期效果來優化染色時間和濃度。

3.1細胞固定：4%多聚甲醛固定細胞，37℃處理15min。

3.2細胞清洗：用HBSS（不含酚紅）清洗細胞三次。不要透化細胞！！！

3.3準備染色工作液：用合適的生理緩沖液，比如：HBSS（無酚紅）（Cat#：FSH041-500ML）或HHBS（Cat#：FSH043-500ML），稀釋Alexa Fluor 488-WGA（2mg/ml）儲存液到工作濃度，常用工作濃度范圍為5-20μg/ml。使用細胞培養基稀釋WGA偶聯物用于標記可能導致增高的非細胞染色背景。

3.4細胞標記：加入足量的染色工作液完全覆蓋蓋玻片上的細胞。室溫孵育10-30min。

3.5細胞清洗：標記結束后，吸走染色工作液，用合適的緩沖液清洗細胞2次。此時可能用0.2% Triton X-100或其它表面活性劑透化細胞，進行接下來的復染或抗體標記。

3.6細胞成像：按照實驗需求用另一復染劑染色，之后在緩沖液內封片或抗熒光淬滅劑來封片。

注意事項

1） 本品儲存液長期保存可能會產生沉淀，使用前請37℃溫育數分鐘，之后離心吸取上清使用。此操作基本不會對產生性能造成負影響。

2） 熒光染料都存在淬滅的問題，保存和操作過程中注意避光。

3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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