產(chǎn)品簡(jiǎn)介

SYTO 9綠色熒光核酸染料（SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain），是一款優(yōu)秀的綠色熒光細(xì)胞核和染色體復(fù)染劑，能滲透進(jìn)入原核和真核細(xì)胞膜。SYTO 9高親和結(jié)合DNA（以及RNA），一旦結(jié)合后呈現(xiàn)明顯增強(qiáng)的熒光信號(hào)，最大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別是483nm和503nm。SYTO 9極其適合用作細(xì)菌實(shí)驗(yàn)的核復(fù)染劑，因其對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌的活細(xì)胞和死細(xì)胞都能染色。SYTO 9常常與碘化丙啶（PI）聯(lián)合使用，用于活/死細(xì)菌染色。

本品以DMSO儲(chǔ)存液形式提供，濃度為5mM。只需用合適的生理緩沖液稀釋到工作濃度進(jìn)行簡(jiǎn)單孵育即可。適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性菌。

若需做雙染，可直接購(gòu)買我司的SYTO 9/PI Live/Dead Bacterial Double Stain Kit 活細(xì)菌/死細(xì)菌雙染試劑盒（貨號(hào)#FS4005-40T）。

產(chǎn)品特性

1） 同義名：SYTO 9 Green dye；SYTO 9綠色熒光染料；

2） 外觀：橙色溶液

3） 熒光特征：EX/Em=485/498nm（與DNA結(jié)合）；EX/Em=486/501nm（與RNA結(jié)合）

熒光特征：EX/Em=485/498nm（與DNA結(jié)合）；EX/Em=486/501nm（與RNA結(jié)合）

圖1. SYTO 9與核酸結(jié)合的光譜特征。A）與DNA結(jié)合的吸收光譜；B）與RNA結(jié)合的吸收光譜；C）與DNA或RNA結(jié)合后的熒光發(fā)射光譜。

4） 滲透性：細(xì)胞通透性

染色流程

基于實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)和發(fā)表方法，建議使用廣譜的染色濃度來(lái)開展使用，并且根據(jù)自身的細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)優(yōu)化摸索出最佳的工作濃度（見表2）。

使用塑料管來(lái)稀釋SYTO 9染料，由于稀釋后的染料會(huì)粘附到玻璃上。總的來(lái)說(shuō)，用不含磷酸鹽的緩沖液來(lái)染色能得到最好的結(jié)果。塑料或玻璃器皿上殘留的去污劑也有可能影響許多細(xì)胞或有機(jī)體的真實(shí)染色，導(dǎo)致在含或不含細(xì)胞的溶液中都能看到發(fā)明亮熒光的材料。確保用溫和去污劑來(lái)清洗玻璃器皿，用熱自來(lái)水完全沖洗干凈，最后用去離子水清洗數(shù)次。

①離心收集細(xì)胞，用生理鹽溶液或水重懸細(xì)胞。貼壁細(xì)胞（比如：哺乳動(dòng)物細(xì)胞）可能在蓋玻片上原位染色。使用表2內(nèi)建議的工作濃度進(jìn)行染色。初次實(shí)驗(yàn)，建議在建議濃度范圍內(nèi)做多個(gè)染料濃度，以確定能得到最佳染色的工作濃度。需要注意：生長(zhǎng)培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、是否存在其它細(xì)胞、和其它因素都可能影響染色。

②染色的真核細(xì)胞通常顯示出彌散的細(xì)胞漿染色和細(xì)胞核染色，特別是經(jīng)?？吹矫髁恋暮藘?nèi)小體染色。由于此染料具細(xì)胞膜滲透性，且中性pH下帶凈正電荷，也有可能染線粒體?；罱湍妇鷥?nèi)主要是線粒體染色。

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